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大鼠成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒的技术资料
点击次数:69 发布时间:2018-11-20
   大鼠成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。下面分析大鼠成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法。
 
  一、选择试剂
 
  选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
 
  二、加样
 
  大鼠成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒可能原因:
 
  1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
 
  2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
 
  3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
 
  大鼠成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒解决办法:
 
  1) 标本为血清:zui好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
 
  2) 加样后及时放入孵箱。
 
  3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
 
  4) 如果采用AT或其他全自动加样,zui好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
 
  5) 标本较多时,请分批操作。
 
  常见大鼠成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒实验技术要点,不看就没了!
 
  我公司技术专员对解析出其实验技术要点,下面一起来看看吧。
 
  1. 准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;
 
  2. 根据检测标本数量确定所需试剂的量;
 
  3. 按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂;
 
  4. 标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。
 
  实验中为了确定*佳信号和*背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
 
  标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
 
  一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
 
  为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig。

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